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GE填料特点为您总结如下

更新时间:2023-02-09   点击次数:362次
  GE填料,也叫 ODS 柱,是分析工作中使用zui多,应用zui广的液相色谱柱,占据了液相色谱柱的半壁江山。正如世界上没有两片*相同的树叶,也没有两款一模一样的 C18 柱,如何在市场上繁杂的 C18 柱中寻找到适合自己分析的那款,是大家非常关心的话题。
  正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为GE填料,其它常用的反相柱还C8,C4,C2和苯基柱等。
  GE填料特点:
  1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物
  2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子
  3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。
  作为凝胶柱层析中的关键一环,选择合适的填料是关重要的,下面我们来了解下。
  1.当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中,可简易地测出PI,并选择纯化用缓冲液的佳PH。
  2.若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解,可尝试几种不同的纯化方法:
  (1)使用通用的凝胶过滤方法,选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将 样品分成不同组份。
  (2)用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质,再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
  (3)体积大的样品,往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品,可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理,洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。